類別
PREDICELL™套件
轉(zhuǎn)運
蛋白MATE1
技術(shù)
吸收轉(zhuǎn)運蛋白分析
攝取轉(zhuǎn)運蛋白分析
轉(zhuǎn)運蛋白的細(xì)胞攝取機制在許多與結(jié)構(gòu)無關(guān)的藥物的藥代動力學(xué)中起著關(guān)鍵作用。這些蛋白質(zhì)存在于所有重要的藥理屏障組織中，能夠使中低滲透性藥物跨質(zhì)膜轉(zhuǎn)運，從而確定吸收，分布和消除途徑。與攝取轉(zhuǎn)運蛋白相互作用的測試有可能預(yù)測藥物在系統(tǒng)水平運動中的主要因素。評估受試物對攝取轉(zhuǎn)運蛋白的抑制潛力可能表明藥物與藥物之間的相互作用，例如在環(huán)孢菌素A和他汀類藥物1、2的情況下。
如今，聯(lián)合療法已廣泛用于許多不同治療類別的藥物。他汀類藥物通常與其他藥物（例如免疫抑制劑，抗糖尿病藥或貝特類藥物）合用，以在診所治療患者。這增加了在這些藥物顯著的藥物相互作用的風(fēng)險3，4，5，6。
因此，重要的是通過使用適當(dāng)的體外工具來指導(dǎo)藥物開發(fā)中的量身定制的臨床相互作用研究，來解決與各個患者群體相關(guān)的可能的藥物-藥物相互作用風(fēng)險。除了建立完善的細(xì)胞色素P450相互作用研究以外，藥物相互作用還可能發(fā)生在藥物主動轉(zhuǎn)運的水平上，涉及OATP和OAT載體和/或不同的ABC轉(zhuǎn)運蛋白。在涉及他汀類藥物的藥物相互作用中，除細(xì)胞色素P450酶外，還發(fā)現(xiàn)OATP溶質(zhì)載體家族的成員也參與其中。
表達人類OATP載體的重組細(xì)胞系通常用于研究這些載體7的體外藥物相互作用的潛能。間接和直接攝取轉(zhuǎn)運蛋白測定是用表達所選人或大鼠攝取轉(zhuǎn)運蛋白的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染子進行的。細(xì)胞粘附在處理過的表面上，從而可以輕松分離運輸?shù)暮瓦^量的低滲透性底物分子。
在這些測定中，測量了測試物品（TA）對攝取轉(zhuǎn)運蛋白介導(dǎo)的標(biāo)記探針底物的轉(zhuǎn)運的抑制潛力。用冷TA進行測定。探針底物通過選定的人類攝取轉(zhuǎn)運蛋白轉(zhuǎn)運到轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中。值以相對標(biāo)度表示，其中100％定義為在溶劑存在下且沒有TA（無抑制）的轉(zhuǎn)運，0％定義為在沒有轉(zhuǎn)運蛋白活性下檢測到的轉(zhuǎn)運。IC 50定義為抑制報道分子底物轉(zhuǎn)運50％所需的濃度。該測定法提供了有關(guān)所選攝取轉(zhuǎn)運蛋白與所研究的TA之間可能影響探針底物轉(zhuǎn)運的任何相互作用（底物或抑制劑）的信息。
底物評估通常作為抑制研究的后續(xù)行動，但可以在單獨的模塊中進行。每個模塊都是根據(jù)前一個模塊的結(jié)果計劃和啟動的。
第1單元–檢測主動傳輸?shù)脑圏c實驗：
預(yù)期的結(jié)果是確定是否可以測量攝取轉(zhuǎn)運蛋白介導(dǎo)的冷（或同位素標(biāo)記）化合物進入細(xì)胞的攝取。
模塊2 –運輸?shù)脑敿?xì)動力學(xué)特性：
模塊2的目的是確定KM和Vmax值。將使用已知的底物和抑制劑（在抑制研究中用作探針底物和參考抑制劑）研究運輸抑制作用。將在優(yōu)化的TA濃度和7種濃度的抑制劑/底物分子下研究已知抑制劑/底物對TA轉(zhuǎn)運的影響。
模塊3 –潛在的藥物相互作用的特征：
選擇的已知或未知的藥物的IC50取決于測試物品的運輸。了解有關(guān)我們的轉(zhuǎn)運蛋白測定服務(wù)的更多信息。SOLVO Biotechnology已開發(fā)并獲得了廣泛的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系，用于研究測試物品與攝取轉(zhuǎn)運蛋白的相互作用。我們的承運人產(chǎn)品組合正在不斷擴大。SOLVO還可以定制開發(fā)其他轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系。也可提供攝取轉(zhuǎn)運蛋白過表達細(xì)胞系的許可。
參考文獻：
1. Shitara Y，Itoh T，Sato H，Li AP和Sugiyama Y（2003）J Pharm Exp Ther 304：610-616；2. Shitara Y，Horie T和Sugiyama Y（2006）Eur J Pharm Sci 27：425-446；3. Backman JT，Kyrklund C，Neuvonen M和Neuvonen PJ（2002）Clin Pharmacol Ther 72：685-691。4.Hodel C（2002）Toxicol Lett 128：159-168。5. Williams D和Feely J（2002）Clin Pharmacokinet 41：343-370。6.Campbell SD，de Morais SM和Xu JJ（2004）Chem Biol Interact 150：179-187。7.Hirano M，Maeda K，Shitara Y和Sugiyama Y（2006）Drug Metab Dispos 34：1229-1236。
