Solg™ h-Taq DNA Polymerase說(shuō)明書(shū)
描述：
Solg™-TaqDNA聚合酶是一種熱啟動(dòng)PCR酶，通過(guò)在大腸桿菌中 表達(dá)水熱菌DNA聚合酶基因，處理高純度純化的重組耐熱Taq DNA聚合 酶而產(chǎn)生。在室溫下，化學(xué)處理抑制酶活性，防止非特異性產(chǎn)物或引 物二聚體等非特異性擴(kuò)增，當(dāng)溫度達(dá)到高溫時(shí)，酶重新折疊，恢復(fù)原 有功能。與一般的Taq DNA聚合酶不同，重折疊過(guò)程需要更長(zhǎng)的酶激 活時(shí)間(變性前： 15分鐘)。因此， Solg™-TaqDNA聚合酶對(duì)靶基因 具有較高的特異性，適用于SNP和微衛(wèi)星分析。推薦的PCR產(chǎn)物的擴(kuò)增 長(zhǎng)度小于1Kb.
1.高濃度的模板DNA可以抑制非特異性擴(kuò)增和PCR擴(kuò)增反應(yīng)。因此，最大值不要超過(guò)200 ng，請(qǐng)參考下表。
根據(jù)模板類(lèi)型和濃度進(jìn)行的PCR循環(huán)
2.如果DNA片段具有較高的G+C區(qū)或二級(jí)結(jié)構(gòu)，則加入5X波段Doctor™可以得到改進(jìn)的結(jié)果
3.PCR反應(yīng)的一個(gè)重要因素是是否只有靶基因被特異性擴(kuò)增而沒(méi)有非特異性擴(kuò)增。該產(chǎn)物是一種化學(xué)介導(dǎo)的熱啟動(dòng)P
CR酶，需要在95℃下的酶激活步驟15分鐘?；瘜W(xué)介導(dǎo)的熱啟動(dòng)PCR酶比使用抗taq抗體的熱啟動(dòng)酶具有更好的反應(yīng)特
異性，從而降低了非特異性擴(kuò)增的風(fēng)險(xiǎn)。
4.退火溫度按下式計(jì)算，一般在55~60℃之間。
AT = Tm – (6 ~ 8 ℃), Tm = 2 ℃ x (A + T) + 4 ℃ x (G + C)
提示：
>根據(jù)目標(biāo)大小、引物的Tm值和模板類(lèi)型，必須控制模板量、延伸時(shí)間、退火溫度、Taq量和循環(huán)次數(shù)。
>請(qǐng)保持規(guī)定的儲(chǔ)存溫度恒定，因?yàn)镻CR效率可能會(huì)降低。
>該產(chǎn)品是使用AmpR表達(dá)載體生產(chǎn)的。
>如果您在使用此試劑盒時(shí)遇到任何問(wèn)題，請(qǐng)聯(lián)系Solgent。
